2015-07-27 | 活动信息 云顶国际应用:MALDI-TOF测定重组人钙调磷酸酶B亚基整体分子量
钙调磷酸酶(CN)是目前所知唯一依赖Ca2+/CaM 的ser/thr 蛋白磷酸酶。该酶由A、B 二亚基以1:1 的比例组成异二聚体,A 亚基(CNA)是催化亚基;B 亚基(CNB)是调节亚基,能促进CNA 的活性。CN 在生物体免疫系统和细胞调亡中具有重要的生理功能。CNB 作为CN 的调节亚基,分子量小,性质稳定,作为基因工程药物已经上市。对于基因工程药物研发和质控,对于目标蛋白药物的整体分子量测定是最基本的测试项目之一,在相关的生物药物开发的指导原则上也有明确规定。测定分子量通常有SDS-PAGE、GFC和MALDI-TOF 等方式。前两者的方法通常只能判断大致的分子量范围,而MALDI-TOF 的测定方法快速且质量数准确度高,因此常用于研发和质控的关键环节控制。本文使用了云顶国际MALDI-TOF 测定了基因工程重组蛋白药物rhCNB(重组人钙调磷酸酶B亚基)的整体分子量。该重组蛋白含170 个氨基酸,测得19136.1 的质子化离子,并发现多个多聚体离子。该方法可以快速准确地测定蛋白药物的整体分子量。
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